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1、取切碎的一定量的去脂肪組織樣本,用均質(zhì)機(jī)均質(zhì);
2、稱取5 g均質(zhì)物于50 ml離心管中;
3、向上述50ml管中加入提取劑1溶液3ml,提取劑2溶液1 ml ,然后加入5 ml乙腈,再加入一包提取劑3,蓋上蓋子劇烈振蕩2 min后,室溫下4000 rpm離心5 min;
4、移取7 ml上清液于15 ml離心管中,加入二氯甲烷4ml后,蓋上蓋子顛倒混勻10秒鐘,室溫下4000 rpm離心2 min,棄上清液,移取下層有機(jī)相5ml于5 ml 離心管中,加入50μL催化劑,60μL氧化劑,顛倒混勻10秒,于6 0℃環(huán)境下,利用氮?dú)饣蚩諝獯蹈伞?/span>
5、向吹干的離心管中加入0.3 ml MG復(fù)溶液,和正己烷0.5 ml,于室溫下4000 rpm離心1 min,用移液器移取下層75μl溶液,待檢。
1、從檢測(cè)卡袋中取出所需的檢測(cè)卡,放置室溫復(fù)溫,在卡上做好樣品編號(hào)標(biāo)記。
2、用一次性取樣滴頭吸取樣品,滴入加樣孔3滴(75ul),在加液過(guò)程中勿使液體溢出加樣孔。
3、5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果,15分鐘后的結(jié)果無(wú)效。
1、在4-30℃陰涼避光干燥處儲(chǔ)存,忌冷凍。
2、在4-30℃下的環(huán)境溫度操作。
3、有效期見(jiàn)包裝盒側(cè)面。
4、保存期間應(yīng)避免光照、潮濕和過(guò)熱。檢測(cè)卡保質(zhì)期為12個(gè)月。
5、檢測(cè)線T出現(xiàn),產(chǎn)品失效。
1、過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2、打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
3、不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
4、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5、待檢樣品溶液需清亮、無(wú)混濁顆粒、無(wú)細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
陰性(-):測(cè)試區(qū)(T)和質(zhì)控區(qū)(C)均出現(xiàn)紅色條帶,判定為陰性。
陽(yáng)性(+):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,判定為陽(yáng)性。
無(wú)效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紅色條帶,建議重做。